避免活性损失：磷酸果糖激酶（PFK）测试盒样本前处理与保存条件建议

磷酸果糖激酶（PFK）是糖酵解通路中的关键限速酶，其活性水平易受外界环境影响，在样本采集、处理和储存过程中极易发生降解或失活。为确保使用PFK测试盒获得准确、可靠的检测结果，科学规范的样本前处理与保存至关重要。

一、样本采集与快速处理
组织样本（如肝脏、肌肉、心肌等）应在低温环境下迅速采集，并立即置于预冷的生理盐水中去除血液残留。采集后应尽快进行匀浆处理，建议在冰浴条件下操作，避免因温度升高导致酶蛋白变性。推荐使用预冷的提取缓冲液（通常含蛋白酶抑制剂和还原剂如DTT），以维持PFK的天然构象与催化活性。

二、匀浆与离心控制
匀浆过程应短时、间歇进行，防止机械剪切和产热破坏酶结构。匀浆完成后，需在4℃下高速离心（10,000–12,000 rpm，15–20分钟），取上清液用于检测或进一步分装保存。避免反复冻融上清液，否则会导致蛋白聚集和活性下降。

三、短期与长期保存建议
若样本在24小时内检测，可将上清液置于4℃避光保存。如需长期储存，应将样本分装成单次用量，迅速冷冻至–80℃。不建议使用–20℃冰箱长期保存，因其温度波动较大，易造成酶活性缓慢丧失。

四、避免反复冻融
每次冻融都会显著降低PFK活性。建议在初次处理时即按实验需求分装，每管独立使用，避免多次解冻同一管样本。

五、其他注意事项
避免样本暴露于强光、高温或极端pH环境中；若样本出现浑浊或沉淀，应重新制备。使用前轻轻涡旋混匀，切勿剧烈震荡。

综上所述，严谨的前处理流程与合理的保存策略是保障PFK测试结果稳定性的基础。遵循上述建议，有助于最大限度保留酶活性，提升实验数据的可信度与重复性。